분자병리( HLB파나진 )

PNA(Peptide Nucleic Acid)

1991년 덴마크 코펜하겐대학교의 Nielsen, Egholm, Berg 와 Buchardt 교수에 의해 처음으로 발명된 인공 DNA입니다. PNA는 DNA의 phosphate-ribose 골격이 펩타이드와 비슷한 아마이드 골격 (N-(2-aminoethyl)glycine)으로 치환된 구조를 가짐으로써 DNA 또는 RNA에 대한 결합력과 안정성이 크게 증가되고 backbone의 구조적 변화에도 불구하고 DNA와 마찬가지로 표적 염기서열에 대해 상보적인 결합을 할 수 있기 때문에 DNA가 사용되는 다양한 분야에 활용될 수 있습니다.

PANAMutyper™

PNA clamping probe를 이용하여 wilde type DNA의 증폭을 억제한 후 mutant type DNA만을 선택적으로 증폭하는 PCR 기술(PNAClamp™)과, 형광물질이 표지 된 PNA probe를 이용한 융해 곡선 분석법(Melting Curve Analysis)(PANA RealTyper™)을 접목한 기술입니다. 극소량 포함되어 있는 mutant type DNA를 높은 민감도로 검출할 수 있을 뿐만 아니라 mutant type DNA의 여러가지 유전형을 동시에 genotyping이 가능합니다.

PANA RealTyper™

기술은 형광물질이 표지된 PNA probe를 적용한 융해곡선분석법(Melting Curve Analysis)입니다. 유전자의 염기서열에 따라 각 유전자를 target으로 하는 probe의 고유 융해온도(Tm)가 다르다는 점을 이용하여 여러가지 유전자형을 동시에 명확히 구분해내는 Real-Time PCR 기술입니다. 기존 기술로는 검출하기 어려웠던 인접 염기서열의 차이까지도 별도의 분석프로그램 없이 구분할 수 있으며 정량분석에도 활용이 가능합니다. 다양한 감염성 질환 및 약제내성 돌연변이에 대한 동시 진단에 적합한 기술입니다.

PNAClamp™

wild type DNA에 상보적인 PNA clamping probe를 첨가함으로써 PCR 증폭과정 중 wild type DNA의 증폭을 억제하고 mutant type DNA만을 선택적으로 증폭하여 검출하는 PCR 기술입니다. PNAClamp™는 (target DNA 또는 RNA에 대한) PNA의 강한 결합력, 특이성 및 PNA가 DNA polymerase에 대한 primer로 사용될 수 없는 특징을 이용하여 개발되었습니다. PNAClamp™ 는 PCR 반응만으로 짧은 시간에 mutant type DNA를 정확하게 검출할 수 있고, 특히 소량 포함되어 있는 mutant type DNA를 높은 민감도로 검출 할 수 있는 기술입니다. PNAClamp™를 이용한 clamping 반응은 일반적으로 수행하는 3 단계의 PCR 반응에 추가적으로 PNA가 target site에 결합하는 PNA annealing step이 요구됩니다.

PANA qPCR™

PNA clamping probe를 이용하여 wilde type DNA의 증폭을 억제한 후 mutant type DNA만을 선택적으로 증폭하는 PCR 기술(PNAClamp™)과, 형광물질이 표지 된 PNA probe를 이용한 융해 곡선 분석법(Melting Curve Analysis)(PANA RealTyper™)을 접목한 기술입니다. 극소량 포함되어 있는 mutant type DNA를 높은 민감도로 검출할 수 있을 뿐만 아니라 mutant type DNA의 여러가지 유전형을 동시에 genotyping이 가능합니다.

PANA RealTyper™

PNA probe에 여러 종류의 형광물질을 표지하여, 한번의 PCR 반응으로 다수의 유전자를 동시에 구분할 수 있는 Multiplex Real-Time PCR 기술입니다. PNA probe는 타겟유전자가 존재하면 상보적 결합을 이루게 됩니다. 이때 probe에 부착된 형광과 quencher 사이의 거리가 멀어지면서 형광신호를 발생하게 됩니다. PANA qPCR™은 DNA에 대해 강한 결합력을 지닌 PNA probe를 사용하기 때문에 특이성 및 민감도가 우수한 Real-Time PCR 기술입니다.